当前位置: 首页 » 论文全文
←返回首页
期刊信息:
《药学服务与研究》2018年, 第18卷, 第1期, 第11-15,20页
标题:
肽修饰羧基化多壁碳纳米管基因载体的构建与体外评价
DOI:
10.5428/pcar20180103
作者:
1. 夏清明1(1.第二军医大学长海医院药学部 上海 200433 xqmcy84@126.com)
2. 宫春爱1(1.第二军医大学长海医院药学部 上海 200433 )
3. 顾芬芬2(2.上海交通大学医学院附属新华医院药学部 上海 200093 )
4. 胡楚玲3(3.嘉兴市妇幼保健院药学部 浙江嘉兴 314050 )
5. 高申1(1.第二军医大学长海医院药学部 上海 200433 ggss99@126.com)
摘要:
摘要  目的:制备一种肽修饰羧基化多壁碳纳米管(peptide modified carboxylated multiwalled carbon nanotubes,MHR)基因载体,考察其对HEK293细胞的转染效率及细胞毒性。方法:将羧化的多壁碳纳米管(MWCNTs)与精氨酸(arginine,R)和组氨酸(histidine,H)组成的短肽(HR)按照一定的质量比反应,通过酰胺键连接得到MHR。采用 1H-NMR、红外光谱以及热重分析对其结构进行鉴定。取纯化后的MHR,用激光粒度测定仪测定粒径和zeta电位,凝胶电泳法测定载体MHR对pEGFP质粒的包裹能力。用MHR/pEGFP纳米复合物与HEK293细胞共同培养,考察细胞摄取情况及相关基因转染情况,并测定MHR和MWCNTs-COOH对DU145和RAW264.7细胞的细胞毒性。结果:通过结构鉴定确定MHR合成成功。在氮磷比(N/P)=20时,HEK293细胞对MHR/pEGFP的摄取及转染效率高于其他N/P值时,其中N/P=20时,RAW264.7细胞对MHR/pGL3复合物的摄取率约为单体pGL3的2.4倍,差异具有统计学意义(P<0.05)。细胞毒性实验表明,MHR作用于DU145和RAW264.7细胞24和48 h后,当MHR浓度达640 μg/ml时,DU145和RAW264.7细胞的活性仍然>80%;而MWCNTs-COOH浓度达320 μg/ml时,DU145和RAW264.7细胞活性明显降低;当浓度达640 μg/ml时,细胞活性低于20%。结论:MHR有望成为一种高效、低毒的基因载体。
欢迎阅读《药学服务与研究》!您是该文第 365 位读者!
若需在您的论文中引用此文,请按以下格式著录参考文献:
中文著录格式 夏清明1,宫春爱1,顾芬芬2,胡楚玲3,高申1. 肽修饰羧基化多壁碳纳米管基因载体的构建与体外评价[J]. 药学服务与研究. 2018; 18(1): 11-15,20.
英文著录格式 XIA QingMing1,GONG ChunAi1,GU FenFen2,HU ChuLing3,GAO Shen1. Construction and in vitro evaluation of peptide-modified carboxylated multiwalled carbon nanotube gene vector[J]. Pharmaceutical Care and Research / yao xue fu wu yu yan jiu. 2018; 18(1): 11-15,20.
参考文献:
1. Yousefpour Marzbali M,Yari Khosroushahi A.Polymeric micelles as mighty nanocarriers for cancer gene therapy:a review[J].Cancer Chemother Pharmacol,2017,79(4):637-649.
2. Wong B S,Yoong S L,Jagusiak A,et al.Carbon nanotubes for delivery of small molecule drugs[J].Adv Drug Deliv Rev,2013,65(15):1964-2015.
3. Shi Kam N W,Jessop T C,Wender P A,et al.Nanotube molecular transporters: internalization of carbon nanotube protein conjugates into Mammalian cells[J].J Am Chem Soc,2004,126(22):6850-6851.
4. WU HuiXia,SHI HaiLi,ZHANG Hao,et al.Prostate stem cell antigen antibody-conjugated multiwalled carbon nanotubes for targeted ultrasound imaging and drug delivery[J].Biomaterials,2014,35(20):5369-5380.
5. Gaunt N P,Patil-Sen Y,Baker M J,et al.Carbon nanotubes for stabilization of nanostructured lipid particles[J].Nanoscale,2015,7(3):1090-1095.
6. Skotland T,Iversen T G,Torgersen M L,et al.Cell-pene-trating peptides: possibilities and challenges for drug delivery in vitro and in vivo[J].Molecules,2015,20(7):13313-13323.
7. Margus H,Arukuusk P,Langel ,et al.Characteristics of cell-penetrating peptide/nucleic acid nanoparticles[J].Mol Pharm,2016,13(1):172-179.
8. YAO Chong,TAI ZhongGuang,WANG XiaoYu,et al.Reduction-responsive cross-linked stearyl peptide for effective delivery of plasmid DNA[J].Int J Nanomed,2015,10:3403-3416.
9. WANG YaRun,WANG Yue,KANG Ning,et al.Construction and immunological evaluation of CpG-Au@HBc virus-like nanoparticles as a potential vaccine[J].Nanoscale Res Lett,2016,11(1): 338-347.
10. Cavazzana-Calvo M,Thrasher A,Mavilio F.The future of gene therapy[J].Nature,2004,427(6977):779-781.
11. WANG WeiWei,LI WenZhong,MA Nan,et al.Non-viral gene delivery methods[J].Curr Pharm Biotechnol,2013,14(1):46-60.